某細(xì)胞培養(yǎng)用到的滅菌鍋LDZX-50KBS
導(dǎo)讀:細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)需要準(zhǔn)備哪些儀器設(shè)備和相關(guān)試劑耗材呢，立式壓力滅菌器也是不可少的滅菌儀器，上海申安醫(yī)療器械廠生產(chǎn)的LDZX-50KBS性價(jià)比好，滅菌用儀器。
來源：未知
發(fā)布日期：2020-04-09 20:06【大 中 小】
細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)需要用到的儀器都需要哪些呢：包括電子天平，瑞士Mettler Toledo公司；HH-1恒溫水浴鍋；DGG-9140A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱；LDZX-50KBS立式壓力滅菌器；37XC型倒置顯微鏡；生物安全柜；GPST200型CO2恒溫恒濕培養(yǎng)箱；水浴氮吹儀；6890N型氣相色譜儀，美國(guó)Agilent公司；全波段酶標(biāo)儀，美國(guó)BioTek公司；NikonECLIPSETi-U熒光倒置顯微鏡，日本Nikon公司，實(shí)驗(yàn)材料：人肝細(xì)胞株LO2，購(gòu)自武漢普諾賽生命科技有限公司；胎牛血清( FBS) ；培養(yǎng)基，均購(gòu)自以色列Biolnd公司；青霉素、鏈霉素、胰蛋白酶和噻唑藍(lán)( MTT) ，均購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司；反棕櫚油酸標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司；油酸標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自上海阿拉丁試劑有限公司;牛血清白蛋白( BSA) ，購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；脂質(zhì)氧化( MDA) 檢測(cè)試劑盒、超氧化物歧化酶( SOD) 活性檢測(cè)試劑盒、活性氧( ＲOS) 檢測(cè)試劑盒、BCA檢測(cè)試劑盒，均購(gòu)自碧云天生物技術(shù)研究所; 甘油三酯檢測(cè)試劑盒、膽固醇檢測(cè)試劑盒、油紅染液，均購(gòu)自南京建成科技有限公司。
實(shí)驗(yàn)方法：細(xì)胞培養(yǎng)，將解凍后的LO2細(xì)胞加入含F(xiàn)BS、青霉素和鏈霉素的培養(yǎng)基中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至90%時(shí)，用磷酸鹽緩沖液洗滌細(xì)胞兩次，加入胰蛋白酶、去掉消化液加入培養(yǎng)基將細(xì)胞吹至單細(xì)胞懸液，分裝到新的培養(yǎng)瓶，放置到培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，傳至兩代后用于實(shí)驗(yàn)。消化吹至單細(xì)胞懸液，將細(xì)胞濃度稀釋到105個(gè)/mL，接種于96孔板，每孔加入200μL，每個(gè)濃度設(shè)置6個(gè)平行。將96孔板放至 5%CO2、37℃培養(yǎng)箱中12h，然后加入反棕櫚油酸至不同濃度，脂肪酸儲(chǔ)存液是與不含脂肪酸的結(jié)合配制，稀釋成不同濃度用于實(shí)驗(yàn)，另外設(shè)置與實(shí)驗(yàn)組BSA濃度相同的對(duì)照組。處理24h后加入20μLMTT溶液( 5μg/mL) ，繼續(xù)置于37℃ 處理4h，最后去掉處理液加入150μLDMSO，振蕩混勻10min，于490nm測(cè)定各組OD值。
以上內(nèi)容僅供大家參考。
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