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上海申安滅菌器

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芽孢桿菌測(cè)試選用上海申安LDZM-80KCS

導(dǎo)讀:文中介紹一種芽孢桿菌測(cè)試,上海申安醫(yī)療器械廠生產(chǎn)的立式壓力蒸汽滅菌器可用來(lái)做這種測(cè)試,一般可選用上海申安LDZF和LDZM系列,下面簡(jiǎn)單介紹如下:


返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2019-12-22 21:00【
一般做芽孢桿菌測(cè)試需要選用上海申安醫(yī)療器械廠生產(chǎn)的立式壓力蒸汽滅菌器,因其對(duì)消毒鍋溫度有要求,一般要選134℃,上海申安醫(yī)療器械廠生產(chǎn)的滅菌器溫度到134℃的LDZF和LDZM系列,下面介紹芽孢桿菌測(cè)試除了需要選用上海申安LDZM-80KCS立式壓力蒸汽滅菌器外,還需要用到哪些主要的主要儀器和試劑呢?

PCR擴(kuò)增儀( Bio-Rad,美國(guó)) ; LDZM-80KCS立式壓力蒸汽滅菌器( 申安,上海) ; ZF-20D暗箱式紫外分析儀( 遠(yuǎn)懷,上海) ; 超凈工作臺(tái)( 安泰,蘇州) ;電子生化培養(yǎng)箱( 東聯(lián),哈爾濱) ; 1200系列液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀( Agilen,美國(guó)) ;LC-20AD液相色譜儀( 島津,日本) ; 實(shí)驗(yàn)室其他常規(guī)儀器。 TIANGEN酵母基因組DNA提取試劑盒; 2xTSINGKE Master Mix,10xLoading Buffer; DL2000DNAMaker; 標(biāo)準(zhǔn)品98%surfactin,90%iturin ( Sig- ma) ; 其他試劑均為分析純。
培養(yǎng)基分離培養(yǎng)基: LB瓊脂培養(yǎng)基和海洋培養(yǎng)基購(gòu)自青島高科園海博生物技術(shù)有限公司; 發(fā)酵培養(yǎng)基: LB肉湯培養(yǎng)基; 動(dòng)物病原菌培養(yǎng)基: LB瓊脂培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖瓊脂( PDA) 培養(yǎng)基購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。
動(dòng)物病原菌:大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌Candida albicans均由四川抗菌素工業(yè)研究所菌保中心提供。


菌株分離純化實(shí)驗(yàn)方法:使用稀釋涂布法分離菌株: 首先將沉積物樣品放置于超凈工作臺(tái),過(guò)夜風(fēng)干,稱取2g,加入18mL滅菌蒸餾水(可選用上海申安醫(yī)療器械廠新款不銹鋼蒸餾水器制備可得),震蕩2h。其次將混懸液梯度稀釋至10-1-10-6,分別取100μL懸濁液均勻涂布于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,37℃培養(yǎng)48h。根據(jù)菌落質(zhì)地、大小、顏色和光澤等特征,挑取形態(tài)差異明顯的單菌落。最后重復(fù)2-3次,鏡檢,將已純化的菌株于25%甘油中-80℃保存。
生理生化特征溫度: 將實(shí)驗(yàn)菌株接種到LB固體培養(yǎng)基,在不同的溫度 ( 4-50℃,間隔5℃ ) 下培養(yǎng),此外,在28℃和37℃培養(yǎng)菌株,確定最適生長(zhǎng)溫度和范圍。pH:將30℃條件下培養(yǎng)好的菌株接種到不同pH值( pH = 5-11,間隔0. 5) 的LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3-5d,觀察菌株的生長(zhǎng)情況,測(cè)定菌株在OD600時(shí)的吸光度,以確定最適生長(zhǎng)pH 及范圍。鹽度耐受: 在LB固體培養(yǎng)基上分別添加不同濃度的NaCl( 范圍 0-10% ,間隔1% ) ( w /v)檢測(cè)菌株對(duì)NaCl的耐受程度。酶學(xué)特征: 過(guò)氧化氫
酶活性、氧化酶活性測(cè)定。
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