文中以上海申安醫療器械廠生產的LDZX-75KBS滅菌器對樣品的滅菌,用實驗說明對樣品滅菌的實際效果。
1、模擬實際滅菌情況
藍蓋試劑瓶包裝:將留點溫度計放入500ml藍蓋試劑瓶內,擰緊蓋子后旋松半圈(模擬藍蓋試劑瓶內生物污染樣本滅菌 )。試管包裝:將留點溫度計放入50ml試管內,輕輕旋上膠塞 ( 模擬產生于玻璃管內生物污染樣本滅菌 )。生物垃圾袋包裝方式 : 將溫度計放入密封生物垃圾袋中 ( 模擬直接放于生物垃圾袋內的物品滅菌 )。申安LDZX-75KBS滅菌器內載物量為滿負荷條件下,設置滅菌溫度為121℃、滅菌時間為80min,記錄各個時間點滅菌對象中心部位溫度,計算不同載物量滅菌延遲時間。
2、驗證實際滅菌效果
將生物指示劑管置于藍蓋試劑瓶、試管和生物垃圾袋內,并置于申安LDZX-75KBS滅菌器的中層的中央位置,滅菌器滿負荷運轉。設定滅菌溫度121℃滅菌時間20min,并啟動。經過一個滅菌周期后取出,直接將生物指示劑放于56℃~ 60℃培養箱中培養7天,取另一支未滅菌的指示劑作為陽性對照同時培養。培養后觀察結果,如若經滅菌處理指過示劑保持紫色,即為滅菌合格;若由紫色變為黃色,即為滅菌不合格(同時陽性對照管應由紫色變為黃色)。
3、結果
不同裝載量及放置位置下的結果 :觀察結果留點溫度計不做任何包裹的情況下,在不同放置位置及不同載量的情況下,計算出滅菌延遲時間T值均為0。由于申安LDZX-75KBS滅菌器設定滅菌時間即為滅菌對象中心部位達到滅菌溫度的時間,不存在時間差,即該條件因素不影響滅菌延遲時間。在滿載條件下,各個包裝方式內部溫度到達設定溫度的時間存在較大差異。藍蓋試劑瓶包裝內污染物,其滅菌延遲時間為19min; 試管包裝的條件下,計算得滅菌延遲時間為45min;生物垃圾袋包裝條件下,計算得滅菌延遲時間為26min。
4、申安LDZX-75KBS滅菌器實際滅菌效果檢測結果
在脈沖式壓力蒸汽滅菌器滿載條件下,模擬實際滅菌工作中的情況,主要針對藍蓋試劑瓶、試管以及生物垃圾袋等3種滅菌包裝方式內的污染物進行同時滅菌,將脈沖式壓力蒸汽滅菌器設定滅菌溫度121℃滅菌時間20min,進行滅菌,滅菌結束后各種包裝內的生物指示劑培養后均為陽性,結果表明設定滅菌時間為20min時滅菌無效。
在對脈沖式壓力蒸汽滅菌器的實際使用過程中,滅菌延遲時間會因多種因素而不同,例如,滅菌器的類型、蒸汽排出的方式、滅菌物品的位置、滅菌物品裝載量以及滅菌物品包裝方式等。因此,實驗室應對正在使用的壓力蒸汽滅菌器進行滅菌延遲時間的計算,特別是對于高級生物安全實驗室中使用的壓力蒸汽滅菌器。在設定滅菌時間參數時,需考慮滅菌過程中各個因素對滅菌延遲時間的影響,應適當增加滅菌時間,以確保能夠達到滅菌效果。